Серологическая диагностика клещевого боррелиоза и энцефалита

Комплексное исследование, направленное на диагностику инфицирования и оценку эффективности вакцинации против клещевого энцефалита, а также на диагностику системного клещевого боррелиоза.

Синонимы русские

Клещевой энцефалит; системный клещевой боррелиоз (болезнь Лайма); комплексная серологическая диагностика.

Синонимы английские

Тick-borne encephalitis; tick-borne borreliosis (Lyme borreliosis); comprehensive serological diagnostics.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Клещевой энцефалит – это вирусное природно-очаговое трансмиссивное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением центральной нервной системы. Возбудителем является РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Flavivirus семейства Togaviridae, группа Arboviruses. Инфекция носит сезонный (весенне-летний) характер и передается преимущественно с укусом клещей, также возможен алиментарный путь передачи через инфицированное сырое молоко коров и коз. Инкубационный период заболевания длится от 3 до 21 дней, в среднем 10-14 дней. Клинические проявления носят разнообразный характер. В зависимости от выраженности неврологических расстройств выделяют следующие формы заболевания: лихорадочную, менингеальную, менингоэнцефалитическую, менингоэнцефалополиомиелитическую и полирадикулоневритическую, двухволновый менингоэнцефалит. По степени тяжести инфекция может протекать в легкой, средней или тяжелой форме, что влияет на длительность заболевания, выраженности клинической симптоматики и варианты исхода болезни. Возможно длительное вирусоносительство в виде латентной, персистентной или хронической инфекции.

Диагностика клещевого энцефалита основана на комплексе эпидемиологических, клинических данных, результатах изменений в лабораторных параметрах. В клиническом анализе крови в острый период заболевания может отмечаться лейкоцитоз с абсолютным и относительным увеличением количества нейтрофилов. Также увеличивается скорость оседания эритроцитов, в анализе мочи может наблюдаться транзиторная протеинурия.

В серологической лабораторной диагностике данного заболевания, главным образом, применяется выявление специфических антител к вирусу клещевого энцефалита. В настоящее время для определения антител классов IgM и IgG используется метод твердофазного иммуноферментного анализа. Данные специфические иммуноглобулины вырабатываются иммунной системой в ответ на инфицирование вирусом клещевого энцефалита или на вакцинацию против данного возбудителя. Важным в серологической диагностике является определение нарастания титра специфических антител в парных сыворотках крови, взятых в первые дни болезни и через две-три недели от ее начала. Антитела класса IgM появляются одновременно с первыми симптомами заболевания, достигая максимального уровня через 3,5-4,5 недели с момента инфицирования, затем постепенно снижаясь в течение нескольких месяцев. Специфические антитела класса IgG возникают в крови спустя неделю после появления первых симптомов, достигают максимума через 1,5-2,5 месяца с момента инфицирования и сохраняются на протяжении всей жизни, обеспечивая стойкий иммунитет.

Системный клещевой боррелиоз, или болезнь Лайма, – природно-очаговое трансмиссивное заболевание, возбудителем которого является грамотрицательная подвижная бактерия Borrelia burgdorferi семейства Spirochaetaceae. Заражение человека может происходить после укусов иксодовых клещей, инокуляции боррелий со слюной клеща, возможна трансплацентарная передача возбудителя от матери к плоду. Чаще всего заражение происходит в весенне-летний период активности клещей. Инкубационный период заболевания может длиться от 3 до 32 дней, по данным некоторых авторов – до 60 дней. Клещевой боррелиоз имеет разнообразные клинические проявления: лихорадка, интоксикация, головные боли, распространенная "мигрирующая" эритема на месте контакта клеща с кожей больного, регионарный лимфаденит. При прогрессировании заболевания, его осложнении и несвоевременном применении лечения могут развиться нарушения в виде менингита, менингоэнцефалита, энцефалита и энцефаломиелита, поражение сердца, глаз, рецидивирующие и/или хронические артриты.

Диагностика заболевания основывается на данных эпидемиологического анамнеза, специфических клинических проявлениях и на оценке лабораторных данных. Особую роль играет специфическая лабораторная диагностика при нетипичной картине протекающей инфекции и безэритемных формах заболевания. В данном случае применяется метод полимеразной цепной реакции для выявления ДНК возбудителя Borrelia burgdorferi и серологическая диагностика.

Серологическая диагностика в настоящее время имеет широкое распространение и направлена на определение наличия и концентрации специфических антител классов IgM и IgG к возбудителю системного клещевого боррелиоза. При применении метода твердофазного иммуноферментного анализа диагностическое значение имеет нарастание титра специфических антител в парных сыворотках. Следует отметить, что антитела класса IgM появляются при первых симптомах заболевания, но их количество нарастает сравнительно медленно, достигая максимума через 2-3 недели, а далее снижаясь. Антитела класса IgG выявляются через несколько недель после инфицирования, максимального уровня достигают через 4-6 месяцев. Таким образом, антитела IgM указывают на недавнее заражение, а IgG подходят для более поздней диагностики. Также определение уровня IgG антител применяется при контроле эффективности проводимой терапии против клещевого боррелиоза.

Для чего используется исследование?

• Для комплексной лабораторной диагностики клещевого энцефалита и клещевого боррелиоза;
• для подтверждения текущего или перенесенного клещевого энцефалита;
• для оценки эффективности вакцинации против клещевого энцефалита;
• для установления и подтверждения диагноза "клещевой боррелиоз";
• для оценки эффективности проводимой терапии против клещевого боррелиоза;
• для дифференциальной диагностики поражений центральной нервной системы.

Когда назначается исследование?

• При клинических проявлениях и подозрении на клещевой энцефалит;
• при подозрении на текущий или перенесенный клещевой энцефалит, при проведении вакцинации против клещевого энцефалита;
• при клинических проявлениях и подозрении на клещевой боррелиоз (болезнь Лайма);
• при выявлении или при подозрении на укус клеща, в комплексном обследовании в инфекционном стационаре.

Что означают результаты?

Референсные значения

1. [07-062] Borrelia burgdorferi, IgM, титр

Результат: отрицательный.

КП (коэффициент позитивности): 0 – 0,89.

2. [07-064] Borrelia burgdorferi, IgG, титр

Результат: отрицательный.

КП (коэффициент позитивности): 0 – 0,89.

3. [07-092] Вирус клещевого энцефалита, IgM

Результат: отрицательный.

Концентрация: 0 – 100 ед/мл.

4. [07-093] Вирус клещевого энцефалита, IgG

Концентрация: 0 – 100 ед/мл.

Результат: отрицательный.

Причины повышения:

• текущее или перенесенное заболевание клещевым энцефалитом или клешевым боррелиозом;
• антитела класса IgM против возбудителя клещевого энцефалита: ранние стадии клещевого энцефалита (при этом IgG к вирусу клещевого энцефалита не выявляются); текущий или недавно перенесенный клещевой энцефалит (в сочетании с положительным тестом на IgG к вирусу клещевого энцефалита) при условии, что не проводилась вакцинация против клещевого энцефалита; недавно проведенная вакцинация против клещевого энцефалита;
• антитела класса IgG против возбудителя клещевого энцефалита: наличие активного иммунитета вследствие ранее перенесенной инфекции или вакцинации (если тест на IgM к вирусу клещевого энцефалита отрицательный); текущий или недавно перенесенный клещевой энцефалит (в сочетании с положительным тестом на IgM к вирусу клещевого энцефалита) при условии, что не проводилась вакцинация; проведенная вакцинация против вируса клещевого энцефалита.
• антитела класса IgM против возбудителя клещевого боррелиоза: возможное наличие инфекции, вызванной Borrelia burgdorferi;
• антитела класса IgG против возбудителя клещевого боррелиоза: наличие недавнего инфицирования Borrelia burgdorferi; контроль эффективности проводимой терапии против клещевого боррелиоза.

Причины отрицательного результата / понижения:

• отсутствие клещевого энцефалита, клещевого боррелиоза;
• отсутствие или снижение иммунного ответа;
• ранние сроки инфицирования возбудителем;
• неэффективно проведенная вакцинация против клещевого энцефалита;
• снижение иммунологического ответа после вакцинации;
• ложноотрицательные результаты.

Что может влиять на результат?

• Клинический период заболевания;
• предшествующая вакцинация;
• наличие перекрестно-реагирующих антител к другим возбудителям рода Flavivirus (для клещевого энцефалита);
• для клещевого боррелиоза: инфекции, способные приводить к ложноположительному результату (сифилис, лептоспироз, возвратный тиф, вирус иммунодефицита человека, инфекционный мононуклеоз) и аутоиммунные расстройства;
• особенности иммунного ответа.

Важные замечания

• При интерпретации результатов обследования необходимо учитывать длительность от момента инфицирования, предшествующую вакцинации;
• для комплексной оценки полученных результатов их необходимо сопоставлять с эпидемиологическими, клиническими и другими лабораторными данными.

Также рекомендуется

[02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

[07-095] Вирус клещевого энцефалита, антиген (в ликворе)

[06-060] Белок общий в ликворе

[06-061] Глюкоза в ликворе

[09-039] Borrelia burgdorferi s.l., ДНК [ПЦР]

Кто назначает исследование?

Инфекционист, кардиолог, невролог, офтальмолог, ревматолог, акушер-гинеколог, терапевт, врач общей практики, гастроэнтеролог, нефролог.

Литература

1. Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
2. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.
3. Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
4. Paillard L, Jones KL, Evans AL, Berret J, Jacquet M, Lienhard R, Bouzelboudjen M, Arnemo JM, Swenson JE, Voordouw MJSerological signature of tick-borne pathogens in Scandinavian brown bears over two decades / Parasit Vectors. // 2015 Jul 28;8:398.
5. Pancewicz SA, Garlicki AM, Moniuszko-Malinowska A, Zajkowska J, Kondrusik M, Grygorczuk S, Czupryna P, Dunaj J Diagnosis and treatment of tick-borne diseases recommendations of the Polish Society of Epidemiology and Infectious Diseases. Polish Society of Epidemiology and Infectious Diseases / Przegl Epidemiol. // 2015;69(2):309-16, 421–8.