Антитела к Borrelia, IgM (иммуноблот)

Исследование предназначено для качественного определения антител к антигенам боррелий в сыворотке крови человека для диагностики клещевого боррелиоза (болезни Лайма) и ассоциированных заболеваний: хронической мигрирующей эритемы, доброкачественного кожного лимфаденоза, атрофического хронического акродерматита, артрита, кардита, лимфоцитарного менингорадикулоневрита, нейроборрелиоза. Первыми в крови появляются иммуноглобулины M (IgM). Они выявляются через 2-3 недели после укуса клеща, достигая максимума через 6 недель, затем их уровень постепенно снижается в течение нескольких месяцев и даже лет. Исследование антител IgM оптимально проводить для диагностики недавнего заражения (в течение 1–2 месяцев после первых симптомов).

Синонимы русские

Антитела класса IgM к Borrelia burgdorferi (вестерн-блот), иммуноглобулины класса M к возбудителю боррелиоза (болезни Лайма, клещевого боррелиоза, лайм-боррелиоза).

Синонимы английские

Lyme Disease Antibody (IgM), Western Blot.

Метод исследования

Иммуноблотинг.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Тест выявляет антитела к Borrelia burgdorferi. Эта бактерия относится к группе спирохет и вызывает у человека клещевой боррелиоз (болезнь Лайма).

Человек заражается, если его укусил клещ, который сам был инфицирован B. burgdorferi. Иксодовые клещи, переносчики боррелиоза, – это самая распространенная группа клещей, в умеренном поясе Северного полушария они встречаются повсеместно. Чаще всего заражение людей происходит в период активности клещей – весной и летом.

Инкубационный период боррелиоза составляет несколько недель. На ранних стадиях могут наблюдаться следующие симптомы: усталость, озноб, головные боли. Также при боррелиозе иногда возникает характерная сыпь – мигрирующая эритема (кольцевидное покраснение кожи, которое постепенно расширяется). Если болезнь не лечить, то могут возникнуть серьезные проблемы: боль в суставах, менингит, онемение конечностей, паралич лицевого нерва, расстройства памяти и (в редких случаях) поражения глаз и сердца. Лечение болезни, как правило, эффективно.

При инфицировании лимфоциты человека начинают вырабатывать антитела – специальные белки (иммуноглобулины), которые должны нейтрализовать бактерии. Иммуноглобулины M (IgM) появляются  в крови первыми, через несколько дней после заражения. Однако выявить их удается обычно на более поздних сроках (через 2-3 недели). Примерно через 6 недель концентрация IgM достигает максимума и затем постепенно уменьшается (в течение нескольких месяцев и даже лет).

Антитела другого типа – иммуноглобулины G (IgG) – появляются обычно немного позже и сохраняются в крови дольше. Однако и IgG, и IgM могут присутствовать у человека, который уже выздоровел.

Таким образом, антитела IgM лучше всего подходят для диагностики недавнего заражения (тест на них имеет смысл в течение 1–2 месяцев после первых симптомов).

Анализ на антитела рекомендуется проводить в два этапа. Первый шаг – это определение титра антител IgM и IgG (обычно с помощью ИФА). Второй шаг – белковый иммуноблот (вестерн-блотинг).

Если с помощью ИФА получен отрицательный результат, то его не проверяют, считая достоверным. Если же результат ИФА был  положительный или неточный, то тест проводят еще и с помощью иммуноблота. Иммуноблот более специфичен, чем ИФА, и позволяет отсечь некоторые ложноположительные результаты. Исследование обладает высокой специфичностью (98 %) и чувствительностью (95 %), является более точным по сравнению с ИФА, при тестировании используется рекомбинантный высокоиммуногенный белок VlsE, выделенный из Borrelia burgdorferi, обладающий наибольшей чувствительностью по сравнению с другими антигенами для выявления IgG.

При проведении иммуноблота выявляются антитела к нескольким разным белкам B. burgdorferi. Результат этого теста – качественный, то есть он должен быть однозначным: либо антитела есть, либо их нет. Однако распространена ситуация, когда некоторые белки связались с антителами, а некоторые нет. В таком случае интерпретация результатов исследования зависит от того, какую именно тест-систему используют в диагностической лаборатории. Дело в том, что набор белков для иммуноблота может быть разным. Поэтому каждая фирма-производитель предлагает свои критерии оценки (например, результат считается положительным, если 2 из 3 важнейших белков связались с антителами). Поэтому интерпретацию результатов теста проводят сотрудники диагностической лаборатории, которые знают, какую именно методику использовать, и они же делают окончательный вывод, заражен ли пациент боррелиозом.

Для чего используется исследование?

• Чтобы проверить положительный результат ИФА (или др. серологических методов) для подтверждения диагноза "клещевой боррелиоз".

Когда назначается исследование?

• Когда первый тест (обычно ИФА) выявил антитела против B. burgdorferi;
• когда результаты первого теста (ИФА) были неоднозначные (например, титр антител был очень низким);
• при симптомах клещевого боррелиоза: мигрирующая эритема, повышенная температура, озноб, головная боль, тошнота, повышенная утомляемость, периодическая боль в суставах, костях и мышцах, менингит, паралич лицевого нерва, онемение конечностей, расстройства памяти, поражения глаз и сердца (в редких случаях);
• для оценки эффективности лечения клещевого боррелиоза.

* Перед анализом после укуса клеща должно пройти более 2 недель.

Что означают результаты?

Референсные значения

Компонент	Референсные значения
Антитела класса IgM к VisE Borrelia burgdorferi sensu stricto	Не обнаружено
Антитела класса IgM к p41	Не обнаружено
Антитела класса IgM к p39	Не обнаружено
Антитела класса IgM к OspC Borrelia afzelii	Не обнаружено
Антитела класса IgM к OspC Borrelia burgdorferi sensu stricto	Не обнаружено
Антитела класса IgM к OspC Borrelia garinii	Не обнаружено

Причины отрицательного результата (антитела IgM не обнаружены)

• Боррелиоза нет. Инфекция отсутствует.
• Недавняя инфекция. Если заражение произошло меньше 2-3 недель назад, то уровень антител может быть еще слишком низким и их не удается обнаружить. Это маловероятно, поскольку иммуноблот проводится после того, как получен положительный результат с помощью ИФА. Если существует серьезное подозрение на боррелиоз, то необходимо сдать анализ еще раз, позже.

Причины положительного результата (антитела IgM обнаружены)

• Боррелиоз.
• Ложноположительный результат. Вероятность такого результата меньше, чем в случае ИФА.

Антитела IgМ к Borrelia, сформированные в ранней фазе боррелиозной инфекции, обычно направлены против антигена OspC (p25) – наружный поверхностный белок С – маркер свежей инфекции. Обнаружение IgM-антител против других специфичных антигенов боррелий при отсутствии антител к OspC не считается достаточным указанием на недавно возникшую инфекцию.

Отрицательный результат по IgM-антителам не исключает наличия свежей инфекции, поскольку при повторном заражении могут формироваться только антитела класса IgG.

Ложноположительный результат по IgM-антителам на поздней стадии заболевания может быть связан с инфекционным мононуклеозом, герпес-вирусной инфекцией или аутоиммунными заболеваниями.

Для установления диагноза свежей боррелиозной инфекции полученный положительный результат по антителам класса IgM должен быть обязательно подтвержден через 3-6 недель положительным результатом по антителам класса IgG на свежем образце крови.

 Что может влиять на результат?

• Другие заболевания, например инфекции, вызванные родственными бактериями (спирохетами). Хотя на иммуноблот они влияют меньше, чем на ИФА.
• Ошибка при интерпретации (например, учет неспецифического связывания).

Важные замечания

• Если результат ИФА будет отрицательным, иммуноблот, возможно, не понадобится вообще.
• Надежность иммуноблота высокая, но не абсолютная. Поэтому для уверенности в результате нужно использовать двойное тестирование (вначале ИФА, затем иммуноблот для подтверждения).

Также рекомендуется

[02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

[09-039] Borrelia burgdorferi s.l., ДНК [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, инфекционист, невропатолог, ревматолог.

Литература

• Allen C. S. et al. Prospective Study of Serologic Tests for Lyme Disease. Clin Infect Dis. 2008; 47(2): 188-195.
• Goldman's Cecil Medicine. 24th ed. Goldman L, Schafer A.I., eds. Saunders Elsevier; 2011.