CD4+ Т-лимфоциты, % и абсолютное количество (Т-хелперы, CD4+ T-cells, Percent and Absolute)

Исследование включает в себя определение абсолютного и относительного количества CD4+ Т-лимфоцитов (Т-хелперы). Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

Синонимы русские

Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, Т-клетки, Т-лимфоциты, Т-хелперы.

Синонимы английские

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens, Human T cells, T helper cells.

Метод исследования

Проточная цитометрия, проточная цитофлуориметрия.

Единицы измерения

*10^9/л (10 в ст. 9/л), % (процент).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Иммунофенотипирование – характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

СD4

Использование МКА к CD4 антигену дает возможность количественно охарактеризовать особый клон клеток, получивших название Т-хелперов/индукторов. СD4+ клетки в функциональном отношении делятся на два вида хелперных лимфоцитов: Т-хелперы 1-го порядка (Th1–клетки) и 2-го порядка (Th2-клетки). Различные CD4+ Т-клетки продуцируют разные наборы цитокинов. Th1–клетки (их называют еще клетками гиперчувствительности замедленного типа – ГЗТ) – цитокины для клеточного иммунного ответа: интерлейкин 2 (IL-2), IL-3, g-IFN, TNF-a, TNF-b, среди которых дискриминантным цитокином является g-IFN. Th2 секретируют набор цитокинов, необходимый для гуморального иммунного ответа – IL-3, 4, 5, 6, 10, 13, TNF-b, – среди которых дискриминантным цитокином является IL-4.

Определение количества CD4+ клеток имеет значение в диагностике состояний, связанных с дефектами антителопродукции, и реакций клеточно-опосредованного иммунитета. Показателю числа CD4+ клеток отводится решающая роль для прогноза течения ВИЧ-инфекции.

Функциональное состояние CD4+ лимфоцитов тестируют по цитокиновому профилю: функциональная полноценность Th1–клеток подтверждается по секреции g-IFN, а Th2-клеток – по секреции IL-4.

Метод позволяет определить количество популяции Т-лимфоцитов:

Т-хелперы/индукторы (CD4⁺CD45⁺).

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

С инфекционным синдромом:

частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
урогенитальные инфекции;
грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
рецидивирующий герпес различной локализации;
гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
генерализованные инфекции (сепсис, гнойные менингиты).

С аллергическим (атопическим) синдромом:

атопический дерматит;
нейродермит;
экзема с инфекционным компонентом;
тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

С аутоиммунным синдромом:

ревматоидный артрит;
рассеянный склероз;
диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
аутоиммунный тиреоидит;
неспецифический язвенный колит.

С иммунопролиферативным синдромом:

опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Что означают результаты?

Референсные значения

CD4+ Т-лимфоциты, % и абсолютное количество (Т-хелперы, CD4+ T-cells, Percent and Absolute)

Компонент	Возраст	Референсные значения
Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+)	Младше 2 лет	1,1–3,6 *10^9/л
	2–5 лет	0,7–2,0 *10^9/л
	5–10 лет	0,5–1,8 *10^9/л
	10–16 лет	0,5–1,3 *10^9/л
	Старше 16 лет	0,5–1,2 *10^9/л
Т-хелперы/индукторы (CD3+CD4+CD45+), %	Младше 2 лет	31–54 %
	2–5 лет	34–50 %
	5–16 лет	33–42 %
	Старше 16 лет	30–50 %

Лейкоцитарная формула

Компонент	Пол	Возраст	Референсные значения
Лейкоциты (WBC)		Младше 1 года	6,0–17,5 *10^9/л
		1–2 года	6,0–17,0 *10^9/л
		2–4 года	5,5–15,5 *10^9/л
		4–6 лет	5,0–14,5 *10^9/л
		6–10 лет	4,5–13,5 *10^9/л
		10–16 лет	4,5–13,0 *10^9/л
		Старше 16 лет	4,0–10,0 *10^9/л
Нейтрофилы (NE)		Младше 4 лет	1,5–8,5 *10^9/л
		4–8 лет	1,5–8,0 *10^9/л
		8–16 лет	1,8–8,0 *10^9/л
		Старше 16 лет	1,8–7,7 *10^9/л
Лимфоциты (LY)		Младше 1 года	2,0–11,0 *10^9/л
		1–2 года	3,0–9,5 *10^9/л
		2–4 года	2,0–8,0 *10^9/л
		4–6 лет	1,5–7,0 *10^9/л
		6–8 лет	1,5–6,8 *10^9/л
		8–10 лет	1,5–6,5 *10^9/л
		10–16 лет	1,2–5,2 *10^9/л
		Старше 16 лет	1,0–4,8 *10^9/л
Моноциты (MO)		Младше 1 года	0,05–1,1 *10^9/л
		1–2 года	0,05–0,6 *10^9/л
		2–4 года	0,05–0,5 *10^9/л
		4–16 лет	0,05–0,4 *10^9/л
		Старше 16 лет	0,05–0,82 *10^9/л
Эозинофилы (EO)		Младше 1 года	0,05–0,4 *10^9/л
		1–6 лет	0,02–0,3 *10^9/л
		Старше 6 лет	0,02–0,5 *10^9/л
Базофилы (BA)			0–0,08 *10^9/л
Нейтрофилы, % (NE%)		Младше 1 года	16–45 %
		1–2 года	28–48 %
		2–4 года	32–55 %
		4–6 лет	32–58 %
		6–8 лет	38–60 %
		8–10 лет	41–60 %
		10–16 лет	43–60 %
		Старше 16 лет	47–72 %
Лимфоциты, % (LY%)		Младше 1 года	45–75 %
		1–2 года	37–60 %
		2–4 года	33–55 %
		4–6 лет	33–50 %
		6–8 лет	30–50 %
		8–10 лет	30–46 %
		10–16 лет	30–45 %
		Старше 16 лет	19–37 %
Моноциты, % (MO%)		Младше 1 года	4–10 %
		1–2 года	3–10 %
		Старше 2 лет	3–12 %
Эозинофилы, % (EO%)		Младше 1 года	1–6 %
		1–2 года	1–7 %
		2–4 года	1–6 %
		Старше 4 лет	1–5 %
Базофилы, % (BA%)	женский		0–1,2 %
	мужской		0–1,2 %

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов

Повышение показателя

Снижение показателя

Т-хелперы

(CD3⁺CD4⁺CD45⁺)

Ряд аутоиммунных заболеваний;
гормональный дисбаланс;
некоторые инфекции;
отдельные Т-клеточные лейкозы;
отравление солями бериллия.

Иммунодефицитные состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита);
алкогольная болезнь печени;
аутоиммунные заболевания;
прием иммуносупрессивных препаратов или стероидов.

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.

Важные замечания

Результаты данного исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов.
Оценка показателей в динамике существенно повышает клиническую значимость исследования.

Литература

Зуева Е.Е. Иммунная система, иммунограмма : рекомендации по назначению и применению в лечебно диагностическом процессе /Е.Е Зуева, Е.Б. Русанова, А.В. Куртова, А.П. Рыжак, М.В. горчакова, О.В. Галкина – СПб. – Тверь: ООО "издательство "Триада", 2008. – 60 с.
Кетлинский, С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. – 156 с. Ярилин, А.А. Иммунология : учебник / А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
Никитин, В.Ю. Маркеры активации на Т-хелперах и цитотокси ческих лимфоцитахна различных стадиях хронического вирусного гепатита С / В.Ю. Никитин, И.А. Сухина, В.Н. Цыган [и др.] // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. – 2007. – Т. 17, № 1. – С. 65 – 71.
Хаитов, Р.М. Иммунология : атлас / Р.М. Хаитов, А.А. Ярилин, Б.В. Пинегин.М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 624 с.
Хаитов, Р.М. Иммунология : учебник / Р.М. Хаитов. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
Хаитов, Р.М. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. – 2001. – N4. – С. 4 – 6.
Хаитов, Р.М. Аллергология и иммунология : национальное руководство / под ред. Р.М. Хаитова, Н.И. Ильиной. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 656 с.
Хаитов, Р.М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы : руководство для врачей / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин, А.А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 352 с.
Хайдуков С.В., Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека и их нормативные значения (метод многоцветного цитометрического анализа) /Хайдуков С.В., Зурочка А.В., Тотолян А.А., Черешнев В.А. // Мед. иммунология. – 2009. -Т. 11 (2-3). – С. 227-238.
Boettler, T. T cells with CD4⁺CD25⁺ regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8⁺ T cells during chronic hepatitis C virus infection / T. Boettler, H.C. Spangenberg, C. Neumann-Haefelin [et al.] // J. Virology. − 2005. − _Vol. 79, N 12. −P. 7860 – 7867.
Ginadi, L. Differential expression of T-cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes : a quantitative analysis by flow cytometry / L. Ginadi, N. Farahat, E. Matutes [et al.] // J. Clin. Pathol. – 1996. – Vol. 49, № 1. – P. 539 – 544.
Merser, J.C. Natural killer T-cells : rapid responders controlling immunity and disease / J.C. Merser, M.J. Ragin, A. August // International J. Biochemistry & Cell Biology. – 2005. – № 37. – P. 1337 – 1343.
Ormandy, L.A. Increased Populations of Regulatory T Cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatocellular Carcinoma / L.A. Ormandy, T. Hillemann, H. Wedemeyer [et al.] // J. Cancer Res. − 2005. −_Vol. 65, N 6. − P. 2457 – 2464.
Romagnani, S. Regulation of the T cell response / S. Romagnani // Clin. Exp. Allergy. – 2006. −_Vol. 36. − P. 1357 – 1366.
Sakaguchi, S. Naturally arising FoxP3-expressing CD4⁺CD25⁺regulatory T cells in immunological tolerance to self- and non-self / S. Sakaguchi // Nature Immunol. − 2005. −Vol. 6, N 4. − P. 345 – 352.
Whiteside, T.L. Role of Human Natural Killer Cells in Health and disease / T.L. Whiteside, R.B. Herberman // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1994. – Vol. 1, №2. – P. 125 – 133.